類風濕性關節炎（RA）是一種慢性自身免疫性疾病，其特征是持續的滑膜炎症和關節破壞

，主要由激活的纖維樣滑膜細胞（FLS）驅動，這些細胞表現出對凋亡的抵抗
、增zeng生sheng以yi及ji侵qin襲xi性xing行xing為wei，如ru遷qian移yi和he侵qin襲xi。盡jin管guan疾ji病bing修xiu飾shi抗kang風feng濕shi藥yao物wu和he生sheng物wu製zhi劑ji等deng治zhi療liao取qu得de了le進jin展zhan，但dan許xu多duo患huan者zhe對dui當dang前qian治zhi療liao的de反fan應ying有you限xian，這zhe突tu顯xian了le對duiFLS激活分子機製理解的不足以及針對這些頑固細胞的靶向療法的需求。表觀遺傳學領域的最新進展表明，RNA修飾參與RA發病機製，包括通過ALKBH5和FTO等酶介導的m6A改變
，促進FLS炎症和侵襲性。METTL1與WDR4形成複合物
，是m7G修飾的主要writer，傳統上在tRNA和rRNA中研究，用於癌症和自身免疫疾病的作用。新興證據表明
，METTL1也調控mRNA內部m7G
，影響如癌症轉移和神經幹細胞中的翻譯
，但其在如RA等自身免疫疾病中調控FLS功能的作用仍未探索。

 

 

2025年10月22日，中山大學附屬第一醫院許韓師/肖遊君團隊在《Annals of the Rheumatic Diseases》發表題為“METTL1-mediated internal m7G methylation of cathepsin B mRNA promotes synovial aggression in rheumatoid arthritis”的研究論文。該研究首次揭示類風濕關節炎患者滑膜中METTL1表達升高，通過介導CTSB（組織蛋白酶B）mRNA內部m7G甲基化修飾增強其翻譯效率，進而促進滑膜成纖維樣細胞遷移和侵襲能力，驅動關節破壞；研究團隊通過體內實驗證實，靶向抑製METTL1（通過雜合敲除或關節腔注射shRNA腺病毒）可顯著減輕RA動物模型的關節炎症與骨破壞
，表明靶向METTL1-m7G-CTSB軸有望成為抑製RA滑膜侵襲的新型治療策略。

1.METTL1與內部m7G修飾在RA中異常升高

作者首先通過m7G dot blot分析，發現RA患者FLS中mRNA內部m7G修飾水平顯著上調。進一步檢測發現METTL1在RA FLS中mRNA和蛋白水平均上調。

且滑膜組織中的METTL1表達與DAS28-ESR（疾病活動度評分）呈正相關。體外實驗證實，炎症因子TNF-α和IL-1β可時間依賴性地促進METTL1表達。

多重免疫熒光結果顯示METTL1在滑膜襯層PDPN⁺THY1⁻和下襯層PDPN⁺THY1⁺ FLS中均有表達（H），而siRNA介導的METTL1敲低顯著降低m7G修飾水平（I），提示METTL1是RA中m7G修飾的關鍵調控因子。

2. METTL1依賴酶活性促進FLS細胞骨架重排與侵襲 

研究使用基因敲低策略，通過siRNA（A）和shRNA（B）證實METTL1缺失顯著抑製RA FLS的遷移和侵襲能力。慢病毒介導的METTL1過表達增強這些表型
，但催化失活的METTL1突變體無此效果（C）
，證明其功能依賴於甲基轉移酶活性。

IF結果顯示METTL1敲低減少細胞偽足形成（F-actin/vinculin標記）(D)。機製上，METTL1調控MMP9（基質金屬蛋白酶）的表達和分泌（E、F），但不影響細胞增殖

、凋亡及炎症因子產生，表明METTL1特異性調控RA FLS的侵襲性表型而非一般炎症反應。

3. CTSB為METTL1介導m7G修飾的關鍵靶點

通過m7G的meRIP-seq測序（由表觀生物提供），研究係統分析了對照組和METTL1敲低組RA FLS的全轉錄組m7G修飾圖譜。測序數據顯示m7G修飾富集於"GA"特征序列，主要分布於mRNA的3'UTR和CDS。

差異甲基化分析鑒定出41個m7G修飾改變的基因
，其中CTSB在METTL1敲低後m7G修飾水平顯著降低。

WB證實METTL1敲低降低CTSB蛋白表達
，但不影響其mRNA水平和蛋白穩定性。m7G-RIP-qPCR進一步驗證CTSB mRNA的m7G修飾減少。

通過Polysome profiling（多核糖體圖譜）證實METTL1敲低特異性降低CTSB mRNA的翻譯效率，而雙熒光素酶報告基因實驗則證實METTL1通過調控CTSB mRNA 5'UTR區域特定m7G位點(chr8:11868073)的修飾發揮這一作用(圖3I)。

4. CTSB介導METTL1調控的RA FLS侵襲性

研究發現CTSB在RA FLS中高表達（A
、B）
，且受炎症因子誘導。兩種不同序列的siRNA有效敲低CTSB表達（C、D），顯著抑製RA FLS遷移、侵襲能力(E)和偽足形成(F)，同時降低MMP9表達(G)。

Rescue assay結果表明，在METTL1敲低背景下過表達CTSB可有效逆轉細胞侵襲能力的下降
，證實CTSB是METTL1下遊功能效應分子。這些結果揭示了METTL1-m7G-CTSB軸在調控RA滑膜病理侵襲性中的核心作用。

5. 靶向抑製METTL1改善關節炎動物模型病理表型

最後，研究采用兩種互補策略評估METTL1的治療潛力。首先，在CIA大鼠模型中通過關節腔注射METTL1-shRNA腺病毒（Adv-shMETTL1）進行局部幹預
，結果顯示治療組關節腫脹
、踝關節周徑和關節炎評分顯著降低
，Micro-CT分析證實骨侵蝕減輕
，組織病理學評估顯示滑膜炎症、骨侵蝕和軟骨降解明顯改善，同時滑膜中METTL1和CTSB表達同步下調。其次，在DTHA（延遲型超敏性關節炎）小鼠模型中
，研究利用CRISPR/Cas9技術構建METTL1雜合敲除(METTL1⁺/⁻)小鼠，發現METTL1基因劑量減少同樣能顯著減輕關節炎嚴重程度。這些體內證據為靶向METTL1治療RA提供了轉化醫學依據。